微生物不论染色与否,均可在显微镜下观察,未染色的观察方法有二﹕
1、湿抹片检查(wet mount)﹕先加一滴水或生理食盐水(saline)于载玻片上,再将检体涂抹在水中,覆盖一片盖玻片,然后置于显微镜下观察。湿抹片检查法可以观察到细菌的大小和形状、部份的微细结构和微生物的运动性。湿抹片检查可以使用明视野镜检,也可以使用暗视野镜检。
2、悬滴法(hanging drop method)﹕先将一滴检体滴于盖玻片上,然后翻过来盖在中央有凹槽的载玻片上,使水滴自由悬浮于盖玻片下,允许其中微生物自由运动,此悬滴法主要用途是观察微生物的鞭毛运动情形。
此外,细菌表面或内部有某些构造可与染剂发生离子交换,当染剂中带颜色的染剂离子与细菌结构的离子产生交换,便可以将细菌的特殊结构染色。染色的目的有
(1)鑑定不同菌体之形态;
(2)鑑别不同菌体之结构;
(3)提高显微镜的解像能力。
染剂的种类依带电荷分为﹕
(1)酸性染剂 – 用于碱性结构的染色,例如细胞质之染色;
(2)碱性染剂 – 用于酸性结构的染色,例如细胞核和细胞粒;
(3)中性染剂 – 缺乏可解离的化学基,所以多数可与脂肪结合。
另外所谓媒染剂(mordant),意指可与染剂形成不溶性物质者,常先染剂用于检体,以增加染剂对检体之亲和力,常使用的例子是鞭毛的染色