过滤法-显微镜下菌落计数器计数总菌数操作步骤
信息分类：生命科学资讯 作者:YIYI发布
目的
利用过滤大量液体样品，如：饮用水等测定方法，以了解样品之生菌数。
原理
使用细菌无法通过但液体可通过的无菌滤膜(045 μm)，将滤膜装设于滤器内且套入三角锥形瓶，
待真空抽气过滤后，细菌就会滞留于滤膜上。接着以无菌操作技术将滤膜移至选择或鑑别培养基上，经培养后，可计数滤膜上之菌落数以了解样品之卫生程度
材料
无菌水或无菌085%生理食盐水
平板空白培养基
设备仪器及其他用具
无菌镊子
过滤装置
滤膜(045 μm)
恒温培养箱
菌落计数器
真空帮浦
灭菌容器
步骤与方法
此方法之操作流程如下：
準备样品溶液：以灭菌容器量取样品溶液至少20 ml。
过滤样品溶液：装置过滤器材后，以无菌镊子将滤膜置于漏斗的底部上，而滤膜之格网面朝上。
将滤器漏斗与底座扣住。取10 ml样品溶液注入漏斗中，启动抽气过滤。待样品过滤后，漏斗内层以无菌水洗涤。
滤膜置于平板：中止真空抽气（务必抽乾）后，松开漏斗，以无菌镊子取出滤膜，置于平板空白培养基上。
细菌培养及菌落的计数：将培养皿倒置于37℃恒温培养箱中，经24~48小时培养后以肉眼或于显微镜下观察，
并使用菌落计数器计数总菌数。
实验注意事项
若最后观察之菌落数浓度过浓时，可适当的用无菌水或生理食盐水稀释。
中止真空抽气时，需确认已完全抽乾才可停止，否则会影响结果。
实验结果
观察滤膜的生长状况并计算其菌落数。
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