光学显微镜使用可见光为光源解析度约200到400纳米
远场荧光显微术(far-field fluorescence microscopy)因高灵敏度、高讯噪比、非侵入性、高专一性、撷取影像快速、架设简易等优点,
成为近年来研究生物系统的重要工具。然而,远场光学显微镜受光学绕射极限限制,使用可见光为激发光源时,解析度约200到400奈米,限制其生物应用,
因此开发超高解析度(super resolution)显微术,突破绕射极限成为重要的研究方向。近年来,受激放射耗乏(stimulated emission depletion, STED)
显微术是诸多超高解析度显微术中,影像撷取速度最快且唯一完全利用光学原理而开发的技术,
原理为利用一道甜甜圈型态且波长与荧光波长相符的STED光束与激发光重叠,使其周围的受激分子放射耗乏回到基态而不放光,
每次仅取得接近STED光束中点、光束强度接近零处的数个分子的荧光,而达到超高解析度
架设STED显微镜,并观察以电穿孔法(electroporation)或经由胞吞作用(endocytosis)进入HeLa细胞内,包覆有牛血清白蛋白(bovine serum albumin, BSA)
的荧光奈米钻石粒子,单一35奈米的荧光奈米钻石二维解析度达到40奈米。