观察动物细胞显微镜-常用的转染方法简介
信息分类：生命科学资讯 作者:YIYI发布
观察动物细胞显微镜-常用的转染方法简介
动物基因的转移感染（transfection）作用是将动物的DNA或RNA（甚至是protein）转送进入活体细胞中。
目前，基因转染技术已成为研究基因转殖（transgene）与表达之重要工具，转染作用通常分为过渡性转染
（transient transfection）及稳定性转染（stable transfection）两种类型。
前者是将DNA送入活细胞内，但DNA不会嵌入细胞的染色体中，其基因表达分析一般可在2~3天内进行。
后者是将DNA传送入活细胞，被送入细胞内的DNA不是嵌入染色体DNA，而是成为基因附体（episome）存在于细胞内。
一般而言，环状质体DNA之过渡性转染效果较佳，而直线状质体DNA则在稳定性转染上效果较佳。
目前，基因转染技术常被应用于基因表达之分析研究上，转染前细胞株之选择及测试技术颇为重要，
直接影响基因转殖与表达研究的成败。
常用的转染方法有如下几种：（1）磷酸钙（calcium phosphate）,（2）DEAE-dextran,（3）脂小体（liposome）,
（4）电穿孔（electroporation）,（5）显微注射（microinjection）,（6）病毒感染（retrovirus infection）,
（7）基因枪（gene-gun）等。前两项方法是以化学物质创造一个化学反应环境，让DNA附着到动物细胞之表面，
然后DNA被动物细胞所吞噬。以脂小体为媒介的方式，其主要机制虽不全然清楚，
但DNA带负电之磷酸根会与脂小体表面之正电荷结合，脂小体带正电荷的部分又会与细胞表面带负电荷的唾液酸
（sialic acid）结合，藉以进行转染。电穿孔则藉电流方式进行。
显微注射是在显微镜的帮助下，直接以微细针管将物质穿刺细胞打入。病毒感染是利用多种不同的病毒特性，
将DNA改造成病毒的一部份，另外病毒本身致癌基因或有害人类健康的基因也加以改造，再藉病毒感染方式送入基因。
基因枪是一种粒子枪法（microprojectile bombardment），欲送入的基因可涂裹在细微的粒子子弹上，
再被推压如散弹方式射入目标细胞或组织中。除以上所提七种方式外，在植物基因转殖（transgenic plant）上，
另可利用农杆菌媒介（Agrobacterium-mediated）方式，首先把基因接上载体，
再把载体导入农杆菌，藉由农杆菌为媒介，把外来基因导入植物细胞。
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