细胞切片染色的一些小常识-专业教学显微镜哪有卖
信息分类：生命科学资讯 作者:YIYI发布
染色机转
此方法可显示组织切片之中性与酸性油脂。包含化学与物理
机转，一方面由吸附反应，一方面由化学反应。
Nile Blue Solution有三种主要成分、
（1）暗蓝色、水溶性Nile Blue之Oxazine盐。
（2）Oxazine之游离基，其不溶于水，而溶于油脂，呈红色。
（3）Nile Red Oxazine衍生物，其不溶于水而容于油脂。
一般说，后二者成分只存在少量，若加入少量稀硫酸煮沸可
增加其含量。中性油脂被Nile Blue Sulfate染成红色。酸性油
脂可形成红色或与染色液中之游离基形成盐类，此盐类为油
脂不溶性而呈蓝色。其蓝色可能盖过红色。
大部份脂肪酸成蓝色染色反应。
染色方法
1、组织于Formol-Calcium固定48 ~72 hrs.。
2、以自来水冲洗之。
3、冷冻切片，6 ~8μm厚度切之。
4、于1 % Nile Blue Sulfate Solution，60℃，5 mins.。
5、以60℃蒸馏水洗涤之。
6、以1 % Glacial Acetic Acid洗30 secs.，以除非油脂结合之染料。
7、以60℃蒸馏水洗涤之。
8、以Glycerin Jelly封盖。
染色结果
中性油脂（三酸甘油脂、胆固醇酯、类固醇） 红色至粉红色
酸性油脂（脂肪酸、磷酸） 蓝色
细胞核 蓝色
细胞质 浅蓝色
本法用药
Formol-Calcium
1 % Acetic Acid
1 % Nile Blue Sulfate
测定Nile Blue Sulate是否含有Nile Red Oxazine之
方法为加入一些Xylene，摇荡均匀，若含Nile Red
成分则Xylene层于20 ~ 30 secs.内呈红色。若
Xylene层不呈红色，则将Nile Red Sulfate溶于5 %
Sulfuric Acid，回流蒸馏1 ~2 hrs.
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