偏光显微镜的偏极光观察无需染色的细胞有哪些特点
信息分类：生命科学资讯 作者:YIYI发布
偏光显微镜的偏极光观察无需染色的细胞有哪些特点
Digitonin（洋地黄）反应
染色机转
此法可使用未酯化之胆??固醇。 Digitonin为天然存在之Glncoside，
其与未酯化之胆??固醇行成结晶状之沉淀复合物。
染色方法
1、以10 %中性Formalin缓冲液固定或用新先标本。
2、冷冻切片，6 ~ 8μm厚度切之。
3、将切片置于0.5 % Digitonin Solution数小时。
4、以50 % Alcohol洗涤之。
5、将切片一部份以Sudan Ⅳ or Oil Red O作对比染色。
6、以Apathy's Gum Syrup or Glycerin Gelatin固封。
染色结果
以偏光显微镜偏极光观察未作对比染色部份。其形成针状或成束之Cholesteryl
Digitonides。对于此染色部份，胆固醇具双折光性不呈染色
但胆固醇酯可被油溶性染料染色而丧失其双折光性。
其结果不溶于95 % Alcohol、Acetone、Ethyl Ether or Water，
惟溶于热Alcohol & Methyl Metanol，易溶于Glacial Acetic Acid
而极易溶于Pyridine & Chloral Hydrate。
本法用药 0.5 % Digitonin in 50 % Alcohol
内在HRP之存在会造成困难，尤其于固
定组织之染色时。使用冷冻切片时，大部份红血球会因HRP
溶血而消失，其于白血球之存在，可由戏胞而辨知。
一般使用内在HRP灭活化之方法为将
切片以甲醇与过
氧化氢混合液处理。此法不影响免疫球蛋白之染色，但是影
响抗原之染色则须加以测试。
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