显微观察观察不同种类菌丝样本-倒置生物哪有卖
取32.5g的SDA培养基粉末,加入500ml的三次水(三次蒸馏过的水),共制作二瓶500ml的SDA培养基溶液,
摇动使粉末完全溶解后,经过高压蒸气灭菌,并待其降温。当温度降至手能拿得住的热度时,
我们将已灭菌的液态培养基,分别倒入培养皿中,每个培养皿中倒入一定的量,大约盖住底部约三分之二
,再稍稍晃动使其均匀分布于培养皿底部,倒入培养皿后便待其冷却凝固,再将其翻面以免
受到污染。我们第一部分先制作了65个固体培养基,不用时将其置于冰箱中保存。
要进行前置实验的前一天,我们先将冰在冰箱中的培养基拿出来,经过一晚的回温,以
免影响真菌的生长。然后隔天早晨7点,在上述我们选出具有指标性意义的14个地点, 选择较
无人经过的地方,将培养皿的盖子打开,使培养基暴露于空气中,收集20分钟内沉降于培养
基上的真菌孢子。20分钟后再盖上盖子,结束收集,然后将培养皿置于25℃培养箱中培养,
三天后再作观察。
三天后我们取出长有各种真菌菌落(菌落上所见多为其菌丝)的培养基,自其中挑出了
16种可能为不同种真菌所长成的菌落,作单一菌种的纯化(single colony purification), 亦即以
灭菌牙籤在菌落上刮一下,其上便沾有真菌的孢子,然后将其于另一新的培养基上涂抹,在
涂抹的过程中孢子可被分散于培养基上,之后在此培养基上所长出的菌落,便可视为单一颗
孢子所长出的菌落,也因为如此,经3天培养后长出的一个菌落便可视为一单一的菌种, 再由
此16个经单一菌种纯化的培养基上所长出的菌落,我们取其菌丝在
显微镜下鉴定其所属的种
类。由于经过菌种纯化的动作,我们不必担心取来作显微观察的样本会有好几种菌丝杂处的情形