显微镜下用微小玻璃针挑出微量的白血球细胞实验
信息分类：生命科学资讯 作者:YIYI发布
显微镜下用微小玻璃针挑出微量的白血球细胞实验
DNA检品量过少，再经DNA萃取纯化后，检品DNA往往已漏失不见的困扰，
尽管PCR技术理论上应可将极微量的DNA做等比级数的扩大，但漏失不完整的、
甚至是完全漏失DNA的检品，就算是使用目前最受嘱目并广泛运用于人别鉴定的short tandem repeats（STR），
虽有其DNA长度较短、较容易PCR复制的优点，也常常无法得到完美的STR 基因座分型结果。
解决微量证物的DNA检出不良情形，曾实验以显微注射系统，
在显微镜下用特殊微小玻璃针挑出检品中微量的白血球细胞， 舍弃一般传统标准的DNA萃取方式，
利用热涨冷缩的原理将细胞DNA释放出来，经PE Applied Biosystems公司出品的STR AmpFlSTR Cofiler Kit试验，
其基因座包括D3S1358、D16S539、TH01、TPOX、 CSF1PO 、D7S820及可辨别性别的Amelogenin，
在初步的研究发现，在单一细胞PCR的Cofiler STR分型的实验中，大多数的基因座型别可被成功分型出来，
但也有些异合子（Heterozygous loci）基因座型别因优势的PCR复制产生基因型漏失或因复制不全导致基因型
增多等基因座型别失真的现象，幸运的是并非所有的单一细胞PCR皆会产生基因型漏失或基因型增多的失真现象，
所以多次重复做单一细胞PCR的分析将可得到较正确的结果，
单一细胞PCR Cofiler STR分型的实验中虽未能得到稳定的结果，但将此技术使用粒线体DNA的定序分型上，
却有明确及稳定的结果可供鉴定。另外将白血球细胞数提高至10至30个来进行Cofiler STR的微量细胞PCR分型，
所有的基因座型别皆可稳定正确的表现出来，建立在上述的研究基础上，
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