透明膜(Zona Pellucida)移除
仪器
2. 细胞培养箱 (37℃,5% CO2)
材料
1. 未着床的胚胎 (以 morula aggregation 为例:取 2.5 dpc 的胚胎)
2. 聚合盘
3. 塑胶培养皿
4. 口吹式毛细管组
5. Acid Tyrode's solution (e.g., Sigma T1788)
6. M2 及 M16 培养液
实验步骤
1. 于塑胶培养皿中準备数滴 M2 及 Acid Tyrode’s 溶液液滴。
2. 将胚胎置入 M2 液滴中。一次取 20~50 颗胚胎于 Acid Tyrode’s 液滴中清洗,待透明膜溶解后迅速将
胚胎置入 M2 液滴中清洗,重复此步骤将所有胚胎的透明膜清除。
3. 将胚胎以 M16 液滴清洗,将清洗后的胚胎置入聚合盘洞中培养(两颗胚胎与胚胎干细胞团进行融合)