(1)因生长中的肌肉组织中,骨骼肌单核前体细胞数量较多,
因此,为提高培养的成功率,培养所用的组织材料应尽量取自动物的幼体或胚胎
(2)因成肌细胞比非成肌细胞贴壁慢,可采用反复贴壁的方法,
减少原代培养中非成肌细胞的污染。
(3)良好的培养条件,如向培养基中加人胎牛血清、将细胞接种于明胶上等,
可避免培养的成肌细胞发生去分化的现象,促使其向成熟骨骼肌细胞转变,
即:细胞间大量融合形成多核细胞、细胞发生自发性收缩等。
在接种后24h左右,大多数细胞已贴壁并开始增殖;经培养2d后,
细胞进人对数生长期,细胞呈梭形,中央有单个胞核,胞质透明度高。
随着培养时间的延长,细胞间开始发生大量的融合,
细胞的自发性收缩也逐渐变得明显,显微镜下细胞内可观察到骨骼肌特征性横纹的出