在骨髓中,存在许多不同的细胞族群,如:血源性干细胞、红血球前
趋细胞、嗜中性球前趋细胞、嗜酸性球前趋细胞、嗜碱性球前趋细胞、红
血球、嗜中性球、嗜酸性球、嗜碱性球、血小板、单核球、巨核细胞、间
叶干细胞、造骨细胞的前趋细胞、造骨细胞、破骨细胞等。在众多细胞族
群中,要如何分离并纯化骨髓间叶干细胞,是当前的一个难题。
依据骨髓间叶干细胞的特性,综合了以下几种可能的方法。
一、以ammonium chloride/EDTA 处理骨髓细胞,此种方法可将无核的红
血球溶解,剩下的则为有核的骨髓细胞,这种方法所得到的有核细胞仍是
相当複杂,无法得到较纯的干细胞。
二、将骨髓细胞培养于培养皿中,培养后,将悬浮未贴附的细胞洗去。
三、使用不同孔径的过滤器
(filter),依据细胞的大小分离出不同的细胞族群。四、使用比
重梯度分离法,离心后,进行培养。五、细胞表面标记(CD marker),利用
细胞上特有的细胞表面标记为抗原,以专一的抗体去结合抗原,再用磁性
细胞分类机(magnetic cell sorter, MACS),或是萤光激化细
胞分类机(fluorescence-activated cell sorter, FACS)将标记的细胞
分离出来。此种方式所获得的细胞最纯,且可使用多个不同的细胞标记来
做多次筛选