细胞粗微体制备的原理-试验生物显微镜
信息分类：生命科学资讯 作者:YIYI发布
细胞粗微体制备的原理-试验生物显微镜
有多种从组织培养细胞中分离粗微体的方法，
所以这里描述一种方法中每一步的必要条件，并提示特殊环境下的做法，
以便该方法能够根据实验目的来进行修改
为了确保制备的成功，应该考虑到几个一般性问题:
细胞的预处理粗微体制备的原理是基于粗微体的浮力密度，
而浮力密度受到单位面积微体膜中含有的核糖体的数目的影响，
所以最好防止在多聚核糖体洗涤步骤中
由于慢慢冷却导致的多聚核糖休的解离而引起浮力密度的改变
由于蛋白质合成的起始阶段比延伸阶段对低温更敏感，在低温时延伸步骤。
可以继续而起始步骤停止，从而使多聚核糖体解离成为单体或亚单位
为此，细胞收获前5一10分钟往培养基中加人环己酰亚胺(终浓度大约为10μmOL/L )，
同时细胞用含有同样浓度的环己酰胺洗涤这一预处理对收集悬浮细胞尤其重要，
因为冷却培养基需要一定时间.
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