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细胞成像荧光显微镜的分辨率没有电子显微镜(EM)高

信息分类:生命科学资讯    作者:YIYI发布 

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细胞成像荧光显微镜的分辨率没有电子显微镜(EM)高


免疫电子显微镜

    尽管在细胞成像中荧光显微技术发挥着重要的作用,然而荧光显微镜的
分辨率仍然低于电子显微镜(EM)。可是,扫描电子显微镜(SEM)研究显示,
植物表面的生物膜是嵌在有机物质上的多种异种微生物的复杂集合体。
对于研究者而言,令人失望的是电子显微镜下的植物上的绝大部分细菌
细胞仍然是未知的。

    幸运的是,免疫电镜的胶体金标记技术为自然环境中特定微生物的
检测和揭示微生物细胞更为复杂的生物学现象提供了新的研究手段。

胶体金标记技术的优点在于将分子原位定位的高特异性与扫描电镜的
高分辨率结合起来,故在植物病理学研究中得到了广泛的应用。

例如,在Envinia amylovora和Pseudomonas syringae与植物细胞的相互作用过
程中,研究者设计了精妙的电镜实验,提出了Hrp纤毛型分泌效应蛋白的作用模
型。这些研究涉及利用不同尺寸的金颗粒进行单标记和双标记来检测两种蛋白,并用透
射电镜来进行观察[67.681。将特异性抗Salmonella enterica Thompso。血清型的细胞与鞭毛
的单克隆抗体用金进行标记,结合使用扫描电子显微镜,在将该细菌接种于芫婪叶上之
后,研究者能得到Salmonella enterica Thompson血清型的高分辨率的显微成像。更重要
的是,对鞭毛组分进行免疫检测使研究者能观察到沙门菌Thompson血清型的鞭毛是锚
定在叶面上,这表明鞭毛的作用是使细胞a附千植物

除了免疫细胞化学外,研究者根据凝集素、酶和蛋白质等对特定分子结合的特异性开发了
很多其他的细胞化学研究方法来用于电子显微镜的金标记。

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