荧光显微镜使用注意事项
(1)荧光标本不能久存,在强光特别是紫外光的照射下会很快褪色,
因此常在仔细观察标本之前照相存档。因荧光微弱,在人的眼睛暗适应
后看起来还很明亮的物体,实际上比普通显微摄影需要增加几倍的曝光时间,
故应使用感光速度快的全色底片和彩色底片,
如200ASA(24DIN), 400ASA(27DIN)和600ASA的感光片。
(2)荧光显微镜灯泡寿命为200h,启动次数越多,灯泡寿命越短。
高压汞灯启亮后,不得在5min内关闭,一经关闭需冷却后才可重新开启(一般30min后),
否则汞灯寿命缩短。工作间隙时间短时,不要关灯和停机。新灯泡使用时记录时间。
(3)摄影时,选用镜口率大的物镜与低倍照相目镜配用,以提高分辨力。
(4)因照明光源含有
紫外线,眼睛应避免看到光源,常在载物台前上方有黄色遮光板予
以保护,以防紫外线损伤视网膜。
(5)电源应装配稳压器,否则电压不稳,不仅降低高压水银汞灯的使用寿命,而且影响
镜检的效果。
(6)根据生物体的组织、细胞、细胞器、微生物、病毒等要求选择激发光。激发滤光镜和
荧光色素的应用上都必须适合被检物体。表8-2是一些实例应用。
(7)每种荧光染料对激发光的吸收和荧光发射都有高度的选择性和特异性。要提高背
景物的荧光强度,需选用荧光显微镜的光源(波长较短的光)和适于被检荧光物最佳吸收光
谱的激发滤光镜片。
(8)每次检查时间不要超过90min。超过90min,超高压汞灯发光强度逐渐下降,荧光减
弱。标本受紫外光照射15min,荧光明显减弱。