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荧光显微镜常识-荧光光谱的特点-光谱的形状

信息分类:生命科学资讯    作者:YIYI发布 

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荧光显微镜常识-荧光光谱的特点-光谱的形状

    荧光光谱的特点

    (1 )激发光谱和发射光谱的对称性。荧光的激发光谱与吸收光
谱的形状极为相似,并且呈镜像对称关系。这是因为荧光发射一般都
产生于第一激发单重态的最低振动能级在向基态各能级跃迁的过程中,
而吸收光谱产生于基态分子向第一激发单重态各振动能级跃迁的能量
吸收,由于在不同电子能级中不同振动能级之间的能量差相似,因此
出现这种对称关系,需要注意的是这种对应关系来源于能级差的类似,
因此要获得对称的谱图需要以能量(可以是频率或者是波数)作为横
轴。

    (2 )斯托克斯位移(Stokes shift)

    处于溶液状态的分子荧光中,发射荧光的波长通常要比其相应吸
收的光(激发光)波长要长,这种现象由斯托克斯于1852年首次观察
到。从能级图上可以看出,处于激发态的分子自身可以通过振动弛豫
损失部分能量,同时溶剂及体系中其他分子的弛豫现象会使其能量进
一步降低,因此发射光的能量会较激发光要低,发射光谱移向长波方
向。

    (3 )荧光发射光谱的形状与激发光波长无关

    一般情况下,使用不同波长的激发源激发荧光分子,可以获得形
状相同的荧光发射光谱。当荧光分子受激发时,无论其到达哪种激发
状态,都会通过振动弛豫及内转换等过程回到其分子第一激发态的最
低振动能级,荧光的发光则由该能级回到基态的各振动能级过程中发
出,该过程与激发光的波长无关。

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