显微组织化学的方法显微组织化学的方法,可以说是组织化学的
染色方法。这类方法最大的优点是能够保持细胞和组织的形态结构,
并可测定某些化学成分在细胞中的分布位置。
显微组织化学的操作方法和组织学的方法大致相同。但有些性质
极易变化的酶,能被固定剂破坏,因此必须用新鲜组织制成涂片或冰
冻切片。有时可用固定剂固定,但固定必须迅速,最好能在低温下固
定,这样可避免组织成分发生剧烈的变化。
对干燥和温度略有抵抗性的酶,可用冰冻干燥法处理,然后以特
殊的试剂作用切片,使发生颜色反应。但是这类方法有它的局限性,
因为用这些方法只能作定性化学的研究。最近波利斯特(Pollster)
等用可见光谱的显微分光光度法,已可在染色切片上进行定量分析。
例如,显示DNA 的孚尔根(Feulgen )
反应的紫色产物,对550^-570纳米的光谱有极强的吸收能力。根
据这种性能可测定个别细胞核中脱氧核糖核酸的含量。卡斯拍森
(Caspersson)及其学派应用
紫外线分光光度法也可确定细胞中核酸
和蛋白质的含量。