我们在观察或者产生荧光图像时,一个主要问题是离焦区域的样品呈现为物
体上的闪镶点,从而大大降低了信噪比。
而且,在成像过程中. 整个样品被高强度的激发光照射,这样可能会使荧光
剂光致氧化( 也即光致漂白) 。光学扫描显微镜可以减少这些因素的影响,它允
许在非常高分辨力的情况下观察样品,并且对荧光剂只有很低的光致氧化。
光学扫描显微镜逐点照明物体,用聚焦光束( 激光光源) 以X-Y 姗格式很快
地扫描物体。这种栅格式通过重复转动光束偏转振镜装置来实现,即光斑点扫过
物体. 然后用光电倍增管探测系统.
栅格逐点产生图像. 所得图像的强度信息被数字化并且存在电脑里以产生橄
个扫描区域的图像. 扫描显做术的分辨力受激光束的聚焦光斑大小限制,它接近
于所用波长的衍射极限。
另外一种扫描显微术是NipKow盘显微术( 也即串联扫描显微术) 。和上述的
点扫描技术不同.Nipkow 盘显微术通过旋转一个打了许多中心对称孔的非透明盘
来多点照明样品。通过旋转这个盘. 整个样品区域能被高速照明,实现实时成像
或者视频速率成像。