观察表皮细胞的形状及气孔的构造-植物学显微镜
信息分类：生命科学资讯 作者:YIYI发布
观察表皮细胞的形状及气孔的构造-植物学显微镜
目的:观察表皮细胞的形状及气孔的构造
方法与步骤:
1。取样采新鲜无病的成熟的小皮叶片，剪取中上部，分割成2-3cm的组织块。
2.固定以FAA固定24小时，并保存其中。
3.刮去上表皮和叶肉将已固定的叶片转移至清水中清洗数次并浸泡以除去固定液。
再将材料放于小纸片上，用保安刀新刀片(刀刃垂直叶面)轻轻、均匀地刮去上表皮和一些
叶肉，这才便于酶液彻底解离叶肉细胞，仅留下表皮组织。
4.酶解将留存的表皮转移置1一4%混合酶液(果胶酶加纤维素酶各半)中，保持
在25---30℃恒温系件下处理(解离)半小时，待叶肉完全解离后，再将表皮移至培养皿(成
表面皿)中用蒸馏水进行洗刷(此时可借助两支描笔清除叶肉)，换一次蒸馏水转入表面
皿镜检(适合的材料才制片)。
5。染色(海氏苏木精染色法)一媒染用4%铁矾染5-10分钟。
6.水洗自来水漂洗10分钟，蒸馏水过一遍。
7.染色0.5%苏木精染3一5分钟。
8。水洗自来水洗约半分钟。
9.分色2%铁矾分色(约3-4分钟)适度(核、壁呈蓝褐色，其他部为浅蓝灰
色)。
10.水洗自来水漂洗10分钟(在培养皿中进行，再经蒸馏水过一遍。
11.修整表皮在培养皿中以描笔将表皮刷平，然后用纸从水中捞取表皮，仍用描笔
使材料平展，再用眼科小剪刀剪成正方形(3 x 3mm)，不要主脉部分，将小块材料《带
纸的)放入盛水的培养皿中使表皮与纸片分离，并镊出纸片，最后用描笔移至表皿中，立
即盖上镜头纸转入下步。
12.脱水与透明将上项盖有镜头纸的表面皿中的材料进行脱水，脱水剂与透明剂都
摘注在纸上，使其慢慢浸透材料。各级酒精脱水时间为3一5分钟，无水洒精为二次，透
明时，二甲苯也为两次(每次2分钟)。二甲苯与脱水剂都不可太多，以免材料漂浮以致
卷曲。
在脱水、透明工作完成后，将带有二甲苯的材料一片片轻轻地从表面皿边缘移至载玻
片上，决不能一次揭开镜头纸及银出材料。当材料转至载片中央部位后，随即滴树胶封
藏。
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