显微镜口径和分辨率-用与玻璃相近的折射率介质
信息分类：生命科学资讯 作者:YIYI发布
显微镜口径和分辨率-用与玻璃相近的折射率介质
介质的折射率(n)是影响数值口径的另一个因素，各种介质的折射率
空气的折射率是1, μ的角度即使大到180°(实际上这是不可能的，因为这时物镜的镜
头已经碰到观察的标本)，sin μ/2的值仍然是1。因此，以空气作介质的物镜，数值口径是
不可能大于1的。由于空气和光学玻璃的折射率的差异(光学玻璃的折射率是1.50左右).
一部分光被丧失，不能完全进入物镜，实际上就降低了数值口径和相应的分辨率。为了提
高数值口径和分辨率，就必须用与玻璃相近的折射率较高的介质。因此，如用香柏油等作
介质的油浸镜，在其他条件配合下，数值口径可以达到1.4，分辨力可达到0. 2μm
聚光镜和虹彩光圈物镜下的聚光镜对提高物镜的分辨率是很重要的。简易显微镜
没有聚光镜，它得用凹面反光镜，形成一定角度的锥形光往照射标本和物镜，一般只能形
成64。左右的锥形光柱。因此.即使物镜上所标志的数值口径较大，最大数值口径的值也不
能超过0.6(数值口径=1 Xsin32°=0. 6)。为了提高物镜的数值口径，就必须加大锥形光
柱的角度，这就是聚光镜的作用。
聚光镜是由两个或几个透镜组成.它可以使光线从正面和斜面照射标本然后进入物镜，
形成一个大角度的锥形光柱。例如，用上面提到的同样物镜，如果加用聚光镜将光柱的角
度加大到96°，数值口径就可以达到0.8(数值口径=1 Xsin48°=0. 8);使用合理设计的大
角度聚光镜，可以使物镜的分辨率增加1倍。根据结构和作用，聚光镜实质上是一个大的
物镜，它的数值口径很大。常用的阿贝聚光镜，它的数值口径是1. 25。有的聚光镜它的值
可以达到1.4。聚光镜的使用也有折射率差异的问题。由于聚光镜和载玻片之间有空气，
聚光镜的数值口径也不可能大于1，必须在聚光镜和载玻片之间也加香柏油，才能将数值口径
提高到1.0以上。在使用油浸镜的时候，一般只在载玻片和物镜之间加香柏油，为了进一
步提高分辨率，就要在聚光镜和载玻片之间也加香柏油。方法是先在聚光镜上滴香柏油，放
上观察的载玻片，载玻片再加香柏油，然后用油浸镜检视。
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