最终样品准备
样品使用临界点干燥机充分干燥。操作时注意避免由于风干引起的样品表面牵张而导致
由细丝网状结构组成的超微结构被破坏。
4.临界点干燥。根据仪器说明书将载网转移到临界点干燥机内的100%(休积分数)的
乙醇中。在样品上有一层碳附着的时候保存网格。
r.碳涂层(可选但推荐)。当干燥的时候,载网可在电子显微镜进行观察.但此时样
品很容易受损。使用标准的碳涂层仪在样本上轻轻涂一层碳可使样木保持稳定。
B.方法二:非树脂切片
这种方法适用于观察交联稳定的核基质法,或者经典的核基质法。提取的细胞核基
质,以显示分支丝的潜在网络结构。也适用于其他结构的观察,例如细胞骨架及其他标本。
使用特定的抗体和胶体金标记的二抗可以在细胞核丛质或者细胞骨架上定位特定的蛋白质。
非树脂切片是一种用蜂蜡(硬脂酸乙二醇醋)浸润细微结构以便在进行切片的时候给予那些
脆弱的结构以支撑的技术。薄切片制备完成后,蜂蜡会被去除,只留下保护得很好的结构而
没有任何包埋材料的残留。
这种方法结合了全细胞包埋直接观察三维结构和切片的优点。切片对于观察内在的细胞
核结构非常重要,而这常常在全细胞包埋时被核膜所掩盖。和全细胞包埋相同,非树脂切片
尤其适合于进行立体图像的采集。