全息原理是加伯试图提高电子显微镜的分辨率而于1948年
提出的.他指出应用干涉原理我们的确能够同时记录光波的振辐
和位相.在这种方法中,相干的参考光波加到从物体发出的光波
上并且记录由此产生的干涉图样.干涉图样表征着物体,因而称
为全息图(全息图意味着全部记录,即记录振幅与位相).虽然当
我们观察一张全息图时它并不象物体,但是当被记录的图样用适
当选择的再现光照明时,那时从全息图上发出来许多成分光波,
其中一个光波在振幅与位相结构方面与物体完全相似.因此,当
观察这束光波时,效果如同物波仍在原位置一样,虽然物体可能
不在那里.在再现的时候,物波本身是从全息图发出的,因此当观察
这个光波时我们得到整个三维效果.我们可以改变位置和.‘向后观察”
存在的各物体并.且可以向不同距离处聚焦,因此可感到象的深度.
如上所述,大多数显微技术工作的对象都是死的,是经过化学处理固定的
或
冷冻的组织。如光学显微镜要求试样被切成薄片,称为组织切片,其厚度在I-
IOOO微米。切片在可见光中是透明的,并可以用不同的颜料着色以增强不同组
分
的对比性。实际上,制备试样中的每一个步骤都将影响最后结果的质量。显微
技
术中组织切片的制备叮分为如下步骤:固定、清洗、脱水,用过渡溶剂进行渗
透,用包埋介质(石蜡、蜂蜡或树脂等)进行渗透、包埋、切片。该过程从活的
生物组织开始,到组织变成无水而固定的状态存在于人造介质中为止。人造介
质
渗人组织并取代了组织中的水,这样使得组织有足够的硬度而有利于切割成片
。