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泥样中细菌的荧光计数-将封片放于荧光显微镜下观察

信息分类:生命科学小百科    作者:YIYI发布 

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泥样中细菌的荧光计数-将封片放于荧光显微镜下观察

      泥样中细菌的荧光计数法荧光至少染色的高度稀释的染液中
作用40-60 分钟,不影响细菌生长,可作为活菌染色。根据菌体荧光
染色或光亮度不同区别死活菌,用蝊橙染色,活菌呈绿色荧光,死菌
发戏色荧光,关死状态发橙黄色荧光,染色计算时应作死菌对照。

    1.配制0.1%焦磷酸纳水溶液,通过4 号滤膜过滤。
    2.在10克泥样中,无菌地取出中央部分约1 克,立即称好余泥的
重量,计算取出的泥样重量。
    3.将1 克泥燕放入50毫升焦磷酯纳溶液盖好瓶盖,振20分钟成悬
液。
    4.用无菌吸管分别取悬液9 毫升,各加到3 个无菌试管愉,编艰
标签。
    5.在试管中分别加入1.0 和11毫升的啶橙溶液(1/10000 )作用
数分钟。
    6.另取毫升悬液在试管中煮沸10分钟,杀死细菌,加1 毫升啶橙
溶液。
    7.各取0.01毫升上述的两种染色菌液于无菌载玻片上,涂成1 厘
米见方(先用腊笔划好范围),加上盖玻片,旁边用凡土林封起来。
    8.将封片放于荧光显微镜下观察,计算呈现绿色光点,即是活菌
数,注意所制死菌片的观察对照。
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