三维影像可视作整体或更精细地观察单个断面
共焦扫描显微术
显微技术近年来的发展是共焦扫描
显微镜(confocal scanning microscope,
CSM)的产生。共焦扫描显微镜有着比其他形式的
光学显微镜分辨率更高、对
比度更强、平面视图(view)更薄的特点。由于CSM能产生三维视图,所以
CSM有助于数字处理,通过数字处理,薄的光学断面的影像可以重新组合为合
成的三维影像。这些三维影像可视作整体或更精细地观察单个断面。共焦扫描显
微镜普遍应用于亮视野、暗视野和荧光显微技术中,而且正发展到用于透射和偏
光显微技术。
共焦(有相同的焦点)显微技术中,必须使用两个透镜来聚焦样品。共焦扫
描显微镜能在连续的焦点平面上截取光学断面(称为Z系列),而使用光阑可在
任何给定时间内仅仅聚焦样品的一个小区域。来自焦点平面的光进入目镜,消除
任何散射光,散射光可以使影像模糊。聚焦的光束在样品表面移动,扫描样品。
因为在任何给定的时间内仅有小部分体积被照亮,所以需要扫描,并且必须收集
许多这样的小体积以获得样品的完整影像。