荧光衰减(光分解作用)
这里的荧光衰减定义在FRP激发期间荧光的减弱,衰减程
度依赖于激发光强度和曝光时间,然而,光分解作用的速
度主要依赖于被吸收的激发光的强度。
因此,定量测微荧光术中必须保持较短的曝光时间,或者
必须用低强度激发光,地这种方法的几个不同的应用中,光
分解作用的速度可以高得在短至1秒的间隔内就使荧光大大
减弱,我们已经讨论了用现代测微荧光计把FRP的衰减维持
在最小的方法,即最好先根据吸收像寻找被测物,如果FRP
不产生可见的吸取时,则根据低强度透射率激发光进行,
为了尽可能地多收集荧乐直观地识别样品,必须采用由中等
们噰的高NA物镜与低倍目镜组成的光收集系统,为了尽可能
地减少衰减,用表面照明
测量时,可借助电子开关而使曝光
时间较短。