制备生物大分子的程序以及制备注意事项
制备生物大分子的唯一目的就是为了对其进行研究而做的事先准备工作。
下面是制备生物大分子的操作程序:
(1).先进行所需生物材料的选择并进行预处理工作。
(2).将所备生物材料的组织细胞进行破碎处理。
(3).进行抽提工作(加以适当的缓冲液,针对蛋白质一般都是使用低盐
溶液)
(4).进行分离、纯化(一般使用沉淀法、离心法、层析法等)。
(5).进行纯度的分析鉴定。
(6).进行产物的浓缩和干燥。
制备生物大分子时必须要注意一些问题:选择好更方面和灵敏的分析方法,
能够起到进行到每一步时都能估算出它的提纯程度;选择合适的含有生物大
分子较多的实验材料;因为提纯工作相对较复杂,尽量在这个过程中减少提
纯步骤;注意避免生物大分子的变性,这就要做到适当的酸碱度、不要进行
较强碰撞、尽量避免产生大量气泡;为防止蛋白质的水解作用加入蛋白酶抑
制剂就能避免。