利用显微镜进行悬浮培养细胞存活率的测定
信息分类：生命科学资讯 作者:MISS-SHENG发布
利用显微镜进行悬浮培养细胞存活率的测定
由于存活的细胞膜它是具有一定的选择透过其它物质的特性的，正
常的存活状态下它是可以允许水分子或其他小分子的物质穿过细胞膜
进入细胞内的，而除这些物质以外的物质是不能通过的。所以通过这
个原理利用台盼蓝或伊文斯蓝这些大分子染料进行细胞的染色，再通
过显微镜来观察这些大分子染料是否进入细胞的体内，从而达到观看
其着色情况来判定细胞是否存活。
以下是进行显微镜测定悬浮培养细胞存活率的实验步骤：
（1）配备好实验材料（实验培养的悬浮细胞）、仪器设备（光学显
微镜、加样器、离心机、玻片等）、试剂（染料）
（2）进行染色 将培养过一段时间的悬浮培养细胞，在真空状态下用
垫了两层滤纸的布氏漏斗进行悬浮培养细胞的抽滤后，放入含量为0.25%
的伊文斯蓝或台盼蓝的溶液离心管中的，进行染色5min,如1000g离心3
秒后，再用新鲜的培养悬浮进行离心3-5次，直到达到液体无色为止。
操作过程中一定要注意细胞不能处于干燥状态。
（3）镜检 将上面以染色的细胞悬浮于新鲜的培养液中，在光学显微
镜下进行观察细胞的染色情况，并做好相应的记录，应观察三个以上范
围内的细胞，进行记录。
（4）进行结果计算 依据上述记录的细胞染色情况计算出细胞的存活率。
本文由出自上海光学仪器厂，转载请注明