问下倒置生物显微镜如何辨别坏死细胞呢？
信息分类：生命科学资讯 作者:yiyi发布
问下倒置生物显微镜如何辨别坏死细胞呢？
上海光学仪器厂回复：
细胞坏死与细胞凋亡：细胞死亡可分细胞坏死和细胞凋亡两种，其作用机制如下
〈1〉细胞凋亡〈apoptisis〉：多细胞生物再胚胎发展过程、免疫调节及维持体内环境恆定中，必须藉由引发自杀的
机制来移除多馀或功能不全的细胞。这种机制因为受到遗传基因的控制，故又称程式性死亡〈programmed cell
death〉。恶劣的环境如过冷或是过热、紫外线，缺氧或化学药物等都可能使细胞伤害，启动程式引发凋亡，可以
保护生物个体，避免细胞脱离控制，造成突长。细胞凋亡一旦发生，将会造成细胞核消失、DNA片段化、最后细
胞分解成许多具有完整细胞膜的凋亡小体〈cell bodies〉。由于细胞膜仍完整，因此其内所含有的细胞分解后有毒
物质并不会释放，因此可避免週遭组织的发炎和伤害。这些凋亡小体很快会被週遭的吞噬细胞〈phagocytes〉或其
他细胞吸收。
〈2〉细胞坏死〈necrosis〉：通常是较严重的物理化学伤害所造成，主要是细胞通透性发生改变而膨胀或破裂，并
造成溶体〈lysosome 〉释放出各种分解酵素和细胞激素〈cytokines〉等物质，而使週遭组织受伤引起发炎反应。
3. 水中污染物对人类细胞的影响：水中的污染物种类包含微生物，包括细菌、病毒、原生动物等；有机物，包
括各种挥发性有机物、合成有机物、消毒副产物、清洁剂、农药等；无机物，包括各种重金属、盐类、氯、溶解
性固体物等。这些污染物对于人体的影响甚钜，故藉由观察细胞经污水处理后的改变，则可了解这些污染物对于
人类细胞的影响。
三. 材料
1. 细胞株：人类子宫颈癌细胞〈HeLa cell〉
2. 试剂：锥蓝-用于染细胞
Saponin-介面活性剂，可将细胞膜均匀打洞，使膜结构鬆散
H2O2-可引起程式性死亡
NaCl-配置生理食盐水，0.9% NaCl为人的等张溶液
3. 待测样本：外双溪溪水
4. 器材：载玻片、盖玻片、微量吸管、光学显微镜
1.细胞鲜活良好时：在倒置生物显微镜下，可以看到细胞透亮，呈自然伸展状态。状态不好时，细胞部分伸展，或飘浮，坏死的细胞有点发黑并飘浮。
2.悬浮细胞主要是根据细胞的透亮程度，状态良好时，细胞透亮，状态不好时，可见细胞有颗粒状，发黑。
3.取部分细胞用4％的台盼兰染色，活细胞不着色，死细胞着色
