显微镜百科 -没有荧光显微镜怎样用有普通光学显微镜测凋亡
没有荧光显微镜怎样用有普通光学显微镜测凋亡
信息分类:技术应用 日期: 2011-6-15 9:44:22
用细胞凋亡检测试剂盒(POD)(Tunnel法)应该可以用普通显微镜观看的。可以用于细胞爬片或冰冻切片。
工作原理:
凋亡的特征是内源性核酸内切酶被激活,细胞自身的染色质或DNA被切割,出现单链或双链切口,并产生与DNA断点数目相同的3-OH末端。末端脱氧核糖核酸转移酶可以将地高辛标记的dUDP标记至3-OH末端,DIG-dUDP结合在DNA断点部位,可以通过生物标记的抗地高辛抗体反应后,再结合链霉亲和素-过氧化物酶,然后加入显色底物DAB予以显色,凋亡的细胞胞核呈黄色,从而可以在显微镜下观察着色的凋亡细胞。
工作原理:
凋亡的特征是内源性核酸内切酶被激活,细胞自身的染色质或DNA被切割,出现单链或双链切口,并产生与DNA断点数目相同的3-OH末端。末端脱氧核糖核酸转移酶可以将地高辛标记的dUDP标记至3-OH末端,DIG-dUDP结合在DNA断点部位,可以通过生物标记的抗地高辛抗体反应后,再结合链霉亲和素-过氧化物酶,然后加入显色底物DAB予以显色,凋亡的细胞胞核呈黄色,从而可以在显微镜下观察着色的凋亡细胞。
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