显微镜百科 -如何提取细胞上清中的有意义蛋白
如何提取细胞上清中的有意义蛋白
信息分类:技术应用 日期: 2011-11-13 0:24:52
我收集的细胞培养上清(含有新生小牛血清),想继续用双向电泳分析。是否应该先测一下蛋白浓度,然后将上清浓缩为沉淀。但是不知道用何种方法更好一些。请您多指教。
公司回复:
您用细胞培养上清液做2-D的目的是什么呢?您是做分泌表达吗?您想用显微镜观测的目的蛋白是什么?leister说得有道理,血清中的蛋白质可以在2-D电泳中展现的有大约1000个斑点,其中白蛋白和免疫球蛋白含量极高,足以掩盖一些低丰度的分泌表达的蛋白.为什么要用2-D电泳呢,如果单纯检测某种分泌蛋白的话用单向SDS-PAGE就可以了,可以采用透析或硫酸铵沉淀的方法提取分泌蛋白.
公司回复:
您用细胞培养上清液做2-D的目的是什么呢?您是做分泌表达吗?您想用显微镜观测的目的蛋白是什么?leister说得有道理,血清中的蛋白质可以在2-D电泳中展现的有大约1000个斑点,其中白蛋白和免疫球蛋白含量极高,足以掩盖一些低丰度的分泌表达的蛋白.为什么要用2-D电泳呢,如果单纯检测某种分泌蛋白的话用单向SDS-PAGE就可以了,可以采用透析或硫酸铵沉淀的方法提取分泌蛋白.
本文由上海光学仪器厂原创,转载请注明( http://www.sgaaa.com)