酵母菌细胞数之定量分析,显微镜的观察下,酵母菌细胞为圆形颗粒
信息分类：生命科学小百科 作者:YIYI发布
酵母菌细胞数之定量分析
细胞数的定量攸关整个酵母菌增生试验的基础，故一开始考虑采用三种方式进行，一为显微镜下直接计数，一为酵素免疫分析仪(ELISA
reader)测量650 nm吸光值，还有一种方式以分光光度计估算，酵素免疫分析仪与分光光度计原理雷同，均是因增生的细胞产生吸光值，酵素免疫分析仪较快速，一次可以分析96个样品，但能分析的样品量很少约150 mL。为了此试验解酵母菌培养液对细胞计数定量的影响，
以360至800 nm每隔20
nm测其吸光值与含有酵母菌的菌液做一比较，两者趋势一致，波长越短吸光值越向上飘移，360至500 nm培养液影响较大，而波长500至800 nm 之培养液本身吸光值较小，均在0.1以下，应可作为估算酵母菌细胞个数所选择的波长，根据John Wiley
2002是以600 nm为固定波长。John Wiley 2002建议以波长600 nm作为推估酵母菌细胞个数的固定波长，以波长600
nm进行以下测试。
在显微镜的观察下，酵母菌细胞为圆形颗粒，即使浓度低，也因酵母菌以出芽方式生殖，子代与亲代尚未完全分离而集结，浓度低(颗粒计数器小方格内约10个左右)时虽计算较方便，方格间计数变异大，且刚出芽的子代有时很小，容易忽略，计数每个样品的细胞数所发时间多，但酵母菌约90分钟可分裂一次，意即90分钟后细胞数增加一倍，时间不宜延迟太久。故一次处理样本数不多。
以分光光度计与显微镜做比较，有其一致性，而与John
Wiley 2002所统计分析得计算公式(如下式)相差1 倍。
0.1 OD600=1.8
X 106 cell/mL，故本试验以1 OD600=9 X 106 cell/mL估算细胞个数。
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