细胞内的物质运输系统实验步骤之哺乳动物细胞的继代培养！
信息分类：生命科学小百科 作者:YIYI发布
细胞内的物质运输系统实验步骤之哺乳动物细胞的继代培养！
（一）哺乳动物细胞的继代培养
1. 以摄氏37度水浴预热培养液（含有10 % 胎牛血清之 DMEM培养液 ）及 Trypsin （胰蛋白酶）溶液。
2. 以无菌操作方式倒掉旧的培养液，加入1 × PBS溶液（磷酸缓衝液；细胞等张溶液）5 ml，清洗细胞表面。
3. 倒掉清洗液，加入 Trypsin 溶液，静置3分钟，使细胞脱离培养皿表面。
4. 加入含有胎牛血清之培养液5 ml以终止Trypsin的作用后，置入离心机，离心转速为每分钟1500转，共2分钟。
5. 倒掉培养液，加入新鲜的培养液，计数细胞数目后取约2 × 105 个细胞至直径为10 mm的培养皿。补充培养液体积至10 ml后，在培养皿上写上细胞名称、继代数目、日期、细胞数目，将细胞放入二氧化碳培养箱。
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