萤光染色法显微镜镜检好处是易观察还有敏感度好！
信息分类：生命科学小百科 作者:YIYI发布
萤光抗酸菌染色：萤光染色法用在显微镜镜检时容易观察且敏感度较好，
因为萤光染色的抹片一般于250倍至450倍显微镜下镜检，而复红染色的抹片则于800倍至1000倍镜检。
由于显微镜使用的倍数不同，镜检时，相同时间内萤光镜检染色抹片的视野较複红染色抹片广(约4-10倍)，所以萤光染色敏感度较好，此外萤光染色法将抗酸菌于黑色或暗红色背景下染成具黄色光的菌体，而複红染色将抗酸菌于蓝色背景下染成红色菌体，显然萤光染色法较易于观察。萤光染色的抹片应于24小时内镜检，否则萤光可能会消失。虽然将经染色的抹片于5℃隔夜保存可减少萤光的消失，但是最好能于24小时内完成镜检时才染色抹片。
抹片染色步骤如下－
因为萤光染色的抹片一般于250倍至450倍显微镜下镜检，而复红染色的抹片则于800倍至1000倍镜检。
由于显微镜使用的倍数不同，镜检时，相同时间内萤光镜检染色抹片的视野较複红染色抹片广(约4-10倍)，所以萤光染色敏感度较好，此外萤光染色法将抗酸菌于黑色或暗红色背景下染成具黄色光的菌体，而複红染色将抗酸菌于蓝色背景下染成红色菌体，显然萤光染色法较易于观察。萤光染色的抹片应于24小时内镜检，否则萤光可能会消失。虽然将经染色的抹片于5℃隔夜保存可减少萤光的消失，但是最好能于24小时内完成镜检时才染色抹片。
抹片染色步骤如下－
(a) 将已制备完成抹片置于染色架上。
(b) 加入萤光染剂(auramine O或auramine O-rodamine B-phenol)，覆盖整个抹片，静置15分钟。(不必加滤纸片，不必加热)。
(c) 以蒸馏水或去离子水冲洗(所用的水不可含氯，因为氯会干扰萤光的结核菌产生)。
(d) 加入酸性酒精覆盖整个抹片脱色约两分钟。
(e) 以水冲洗抹片后吸乾。
(f) 加入複染溶液(高锰酸钾溶液或acridine orange 溶液)，覆盖整个抹片複染约两分钟。时间不能过长，否则萤光会消失。
(g) 以水冲洗抹片后吸乾，置于空气中乾燥。
(h) 迅速以萤光显微镜镜检。Auramine O染色结核菌为金黄色。Auramine O-rodamine B-phenol染色结核菌为橘红色。高锰酸钾溶液複染背景为黑色，acridine orange溶液複染背景成暗橘色。
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