体视显微镜做新生大鼠海马神经元的原代培养疑问？
如何从新生大鼠脑内获取海马组织的资料？
解答：
需要多次于体视解剖显微镜下练习，处死小鼠，暴露脑组织，分离两侧的海马组织，白色，豌豆状，易碎。需小心。最主要是多练习几次。
原代细胞培养
步骤
(1)、取新生SD大鼠3只，入75%酒精消毒2分钟，断颈取脑。
(2)、将新生鼠脑放入盛有冷的D’Hanks平衡盐溶液的玻璃培养皿内，置冰盘上，于体视解剖显微镜下仔细剥除脑膜，分离两侧海马组织。
(3)、在显微镜下将分离的海马组织放入另一个盛有冷的D’Hanks溶液的玻璃培养皿内，用眼科剪剪成小碎片，并移入15ml离心管中，组织沉底后吸除D’Hanks溶液。
(4)、向离心管中加入37℃ 0.25%胰酶溶液，每6个海马组织加1ml胰酶消化液，放入37℃培养箱中孵育10-15min，每3分钟翻转几下，至组织块间拉丝成团即可。900rpm离心2min。
(5)、吸除胰酶消化液，加入等量的37℃种植液以终止消化，置室温10min。
、加入2ml种植液，以抛光的滴管吹打约15次，分散细胞，静置10min（如仍有组织块，应用200目筛网过滤）。
(7)、调整细胞密度，以90-320/mm2的密度种于六孔板内。置37℃ 5%CO2培养箱中培养。
、24h后全部吸除种植液，更换成Neurobasal + 2% B27培养液培养。此后每周以此液半量换液2次。培养8-10天进行下一步实验。

另外，如果你从来没做过取海马的工作，建议你先在成年SD大鼠上练习，新生鼠海马又薄又小，还很嫩，稍不小心就碎掉了，如果你连它具体位置都不清楚，很容易失败。